1.FUNDAMENTO
- Se trata de una opción muy utilizada para identificación de las distintas bacterias estudiadas
- Son sistemas o equipos multipruebas, consistente en dispositivos con entre 10-50 pocillos,y en cada uno de éstos se desarrolla una prueba bioquímica distinta, lo cual permite realizar a la vez entre 10-50 pruebas.
- Los resultados de las pruebas se expresan de forma numérica, siguiendo las instrucciones, obteniendo al final un código numérico
- Utilizando este código numérico, identificaremos a la bacteria.
2.OBJETIVO
- El objetivo de esta práctica es la identificación de la bacteria por medio de distintas pruebas bioquímicas realizadas al mismo tiempo, debido a que cada uno de los pocillos contienen un sustrato específico para esa prueba
3.MATERIALES
- Papel de filtro
- Guantes
- Suero fisiológico (SSF)
- Mechero Bunsen
- Asa de platino
- Muestra , con la colonia bacteriana en estudio
- Placa API
- Estufa
- Parafina
4. PROCEDIMIENTO
- Realizamos una dilución de la muestra con SSF, por lo que depositamos en un tubo 2 ml de SSF y un par de colonias de la muestra en estudio,hasta conseguir la turbidez 0,5 McFarland.
- Una vez tenemos la dilución hecha,depositamos 20 microlitros en cada uno de los pocillos de la placa API
- Cuando hemos depositado toda la muestra en los distintos pocillos, debemos añadir gotas de parafina a aquellos pocillos que están indicados son un subrayado.
- Una vez finalizado este proceso, colocamos la placa API en un soporte con papel de filtro húmedo,con agua destilada, evitando la desecación de la prueba.
- Tapamos la placa API
- Incubamos 24 horas – 35-37 ºC
- Transcurrido este tiempo en la estufa, procedemos a identificar las reacciones bioquímicas producidas en cada pocillo, determinando características distintas de la bacteria en estudio (Ejemplo: ureasa, glucosa…)
- Anotamos en una ficha el resultado de cada uno de los pocillos, positivo o negativo
- Seguidamente, para cada grupo de tres pruebas, se suma el valor asignado a los positivos
-Con todas las cifras resultantes, obtenemos un código
-La documentación que acompaña al test relaciona esos códigos con la identificación de la bacteria determinada.
5. RESULTADOS